Efeito da exposição de fibroblastos NIH/3T3 a diferentes soluções de diálise peritoneal

Abstract

Introdução: A contínua exposição da membrana peritoneal às soluções de diálise peritoneal convencionais, consideradas não fisiológicas, é um dos fatores de risco para o desenvolvimento de alterações morfológicas e funcionais do peritônio. Objetivo: Comparar a viabilidade celular in vitro de fibroblastos de camundongos NIH/3T3 expostos a diferentes soluções de diálise peritoneal. Materiais e Métodos: Estudo experimental; onde foram realizadas culturas de fibroblastos empregando meios de cultura contendo diferentes soluções de diálise (padrão e pH-neutro) nas 3 concentrações de glicose disponíveis. A viabilidade celular foi avaliada pelo método do sal de tetrazólio. Resultados: A viabilidade celular foi significativamente superior na solução com pH neutro em comparação a solução controle, nas três concentrações de glicose (Densidade óptica-média ± dp: 1. 5%controle 0,295±0,047 vs 1,5%pH neutro 0,372±0,042 P<0,001; 2,3%controle 0,270±0,036 vs 2,3% pH neutro 0,337±0,051 P<0,001; 4,25%controle 0,284±0,037 vs 4,25%pH neutro 0,332 ± 0,032 P<0,001). Não ocorreu diferença significativa na viabilidade celular entre as três concentrações de glicose quando se usou a solução de diálise peritoneal padrão (ANOVA P=0,218), embora a viabilidade celular foi maior após a exposição à solução com pH neutro na concentração de glicose de 1,5% em comparação com 2,3 e 4,25% (ANOVA P=0,008: Bonferroni 1,5% vs 2,3% P=0,033, 1,5% vs 4,25% P=0,014, 2,3% vs 4,25% P=1,00). Conclusão: A viabilidade celular foi maior nos fibroblastos expostos a solução de diálise peritoneal com pH neutro, especialmente nas menores concentrações de glicose. É possível que o pH mais fisiológico e a menor quantidade de produtos de degradação da glicose possam ser responsáveis pelos resultados.

Introduction: Peritoneal membrane continuous exposition to conventional peritoneal dialysis solutions is an important risk factor related to structural and functional alterations. Objective: To compare in vitro cell viability in mice fibroblast NIH/3T3 after exposition to a neutral pH dialysis solution in comparison to cells exposed to a standard solution. Methods: Experimental study. In order to evaluate cellular viability, mice fibroblast NIH/3T3 cell culture were used in media containing conventional peritoneal dialysis solution or a neutral pH peritoneal dialysis fluid. Both solutions were tested in all the commercially available glucose concentrations. Results: Cell viability was evaluated with tetrazolium salt colorimetric assay. Fibroblast viability was significantly superior in the neutral pH solution in comparison to control, in all three glucose concentrations (Optical density - means ± SD: 1. 5%control 0. 295±0. 047 vs 1. 5%neutral pH 0. 372±0. 042 P<0. 001; 2. 3%control 0. 270±0. 036 vs 2. 3%neutral pH 0. 337±0. 051 P<0. 001; 4. 25%control 0. 284±0. 037 vs 4. 25%neutral pH 0,332 ± 0,032 P<0. 001; control vs neutral pH respectively, Student t Test). There was no significant difference in cell viability between the three concentrations of glucose when standard solution was used (ANOVA P=0. 218), although cell viability was higher after exposition to neutral pH peritoneal dialysis fluid at 1. 5% in comparison to 2. 3 and 4. 25% glucose concentrations (ANOVA P=0. 008: Bonferroni 1. 5%vs2. 3% P=0. 033, 1. 5%vs4. 25% P=0. 014, 2. 3%vs4. 25% P=1. 00). Conclusion: Cell viability was higher in the neutral pH dialysis solution, especially in the lower glucose concentration. A more physiological pH and lower glucose degradation products may be responsible for such results.