Resumo: | Angiostrongylus cantonensis e A. costaricensis podem infectar o ser humano
acidentalmente causando a meningite eosinofílica e a angiostrongilíase abdominal,
respectivamente. Ambos possuem diversas espécies de moluscos como hospedeiros
intermediários. O diagnóstico da infecção requer a morte destes moluscos,
interferindo em estudos de conservação e dinâmica populacional. Este trabalho teve
como objetivo principal encontrar possíveis marcadores biológicos para a infecção de
hospedeiros intermediários, bem como investigar fatores relacionados a relação
parasito-hospedeiro entre moluscos e Angiostrongylus cantonensis. Exemplares de
Phyllocaulis sp. foram infectados com larva de primeiro estádio de A. cantonensis. O
muco e fezes destes animais infectados e não infectados foram utilizados para análise
de expressão diferencial de proteínas por espectrometria de massas e análise do perfil
do microbioma por sequenciamento do gene ribossomal 16S, respectivamente. As
análises de espectrometria por LC-MS/MS mostraram um aumento das proteínas da
subfamília F-BAR e diminuição do fator de alongamento de Mycoplasma spp. O
microbioma das fezes de lesmas infectadas apresentou uma diminuição do filo
Bacteroidetes. Também foram analisados o perfil do microbioma de fezes de
Biomphalaria glabrata infectadas com A. cantonensis e Schistosoma mansoni. Nas
fezes de caramujos infectados com A. cantonensis foram observados uma diminuição
do gênero Vogesella; Já quando infectados com S. mansoni, houve redução dos
gêneros Mycoplasma e Nitrospira e aumento de Niabella. Em ambas as infecções, a
diminuição de Fluviicola e o aumento de organismos da família Weeksellaceae foram
significativos. Estes resultados mostram que proteínas e microorganismos são
promissores biomarcadores da infecção de A. cantonensis em hospedeiros
intermediários, objetivando o desenvolvimento de métodos diagnósticos in vivo.
Durante as coletas de moluscos, foi encontrada, pela primeira vez, a espécie invasora
Meghimatium pictum infectada com A. costaricensis associada a um caso de
Angiostrongilíase abdominal, relato que compõe essa tese. Paralelamente a este
estudo, foram acompanhadas as posturas de Limax sp. e Phyllocaulis sp. durante o
desenvolvimento embrionário, com o objetivo de registrar e investigar a
embriogênese destes hospedeiros. Nas posturas e em moluscos em decomposição,
foram identificados ácaros da espécie Caloglyphus berlesei, em associação observada
pela primeira vez. Angiostrongylus cantonensis and A. costaricensis can accidentally infect humans
causing eosinophilic meningitis and abdominal angiostrongyliasis, respectively. Both
species have several mollusks as intermediate hosts. Diagnosing the infection
requires killing the mollusks, interfering in conservational and population dynamics
studies. This work had the objective to demonstrate possible biological markers in
infected intermediate hosts, as well as to investigate specific factors related to the
parasite-host relationship of mollusks and Angiostrongylus parasites. Mollusks of the
Veronicellidae family were infected with A. cantonensis L1. Mucus and feces from
these infected and uninfected animals were used for differential expression analysis of
proteins using mass spectrometry and the microbiome profile analysis was performed
through the 16S gene sequencing, respectively. LC-MS/MS spectrometry analysis
showed an increase in F-BAR proteins subfamily and a decrease in the elongation
factor of Mycoplasma spp. Microbiome of feces from infected slugs presented a
decrease of the Bacteroidetes phylum. We have also analyzed the microbiome profile
of Biomphalaria glabrata feces infected with A. cantonensis and Schistosoma
mansoni. We could observe a decrease of Vogesella genus. When infected with S.
mansoni, a reduction of Mycoplasma and Nitrospira genera and an increase in
Niabella genus could be demonstrated. In both infections, decrease of Fluviicola
genus and increase of organisms of the Weeksellaceae family were significant. Our
results showed that proteins and microorganisms could be promising biomarkers of A.
cantonensis infection in intermediate hosts in vivo. During the collection of the
mollusks, the invasive species Meghimatium pictum infected with A. costaricensis
was found, associated to a case of abdominal angiostrongyliasis, reported in this
thesis. Parallel to this study, the postures of Limax sp. and Phyllocaulis sp. were
registered to investigate the embryogenesis of these animals. In postures and in
decomposing mollusks, mites of the species Caloglyphus berlesei were also identified
and this association was observed for the first time. |