| Resumen: | A memória permite que os animais possam adaptar e modificar seu comportamento diante de novas
experiências. Uma série de fatores pode resultar num déficit de memória como: doenças
neurodegenerativas, alterações decorrentes de intoxicações e uso de fármacos. O peixe-zebra vem
sendo usado para modelar características comportamentais humanas complexas, como o
aprendizado e memória. Este estudo tem como objetivo estabelecer um protocolo para avaliar
tarefas de memória de reconhecimento de objetos ou de localização de objetos no peixe-zebra. Nós
avaliamos a memória de reconhecimento de objeto novo e analisamos o tempo de exploração de
objetos novos e familiares nas sessões de treino e teste. Houve uma preferência do animal em
explorar o novo objeto em comparação com o objeto familiar (61% do tempo de exploração).
Também avaliamos a tarefa de localização de objeto e medimos o tempo de exploração de cada
objeto nos locais familiares e novos. Houve uma preferência do animal para explorar o objeto na
localização nova em comparação com o objeto na localização familiar (63% do tempo de
exploração). Também avaliamos o efeito do antagonista não competitivo do receptor NMDA MK801 na memória de reconhecimento de objeto novo e na localização de objeto em peixe-zebra.
Neste tratamento, o controle (somente água) e os animais tratados (MK-801 5 μM) apresentaram
uma preferência significativa na exploração do objeto familiar em comparação com o novo objeto
(66 e 68% do tempo de exploração, respectivamente); no entanto, animais tratados com MK-801 10
μM não mostraram diferenças no tempo de exploração dos objetos. Na tarefa de localização de
objeto, os animais tratados com MK-801 5 ou 10 μM não mostraram preferência significativa pelo
objeto na localização familiar ou nova, enquanto que o grupo controle teve uma preferência maior
em explorar o objeto na localização familiar (64% de tempo de exploração). Portanto, sugere-se que
o MK-801 5 μM prejudicou a formação da memória em uma tarefa de localização de objeto, o que
está de acordo com estudos prévios, demonstrando o déficit cognitivo induzido pelo MK-801 em
memórias aversivas ou espaciais. Considerando as diferentes respostas do grupo controle entre a
tarefa original e no tratamento, avaliamos o impacto da habituação nos níveis de cortisol dos
animais em três protocolos diferentes: 1) habituado ao aparato experimental por 3 dias (Condição 1
- C1) 2) habituado ao aparato experimental por 3 dias mais a exposição ao aquário de tratamento no
quarto dia (Condição 2 - C2), 3) habituado na exposição ao aquário de tratamento e no aparato
experimental por 3 dias e exposto ao aquário de tratamento novamente no quarto dia (Condição 3 -
C3). Os resultados mostraram níveis mais elevados de cortisol em animais submetidos a condições
C2 e C3 em comparação com animais submetidos a C1. Esses resultados demonstraram que os
animais submetidos à exposição ao aquário de tratamento apresentam desempenho diferente nas
tarefas de memória de reconhecimento de objetos e de localização do objeto devido ao estresse.
Portanto, essas tarefas são adequadas para avaliar a memória em condições fisiológicas e
patológicas, mas seu uso é limitado em estudos farmacológicos devido à sensibilidade ao estresse
causado pela manipulação.
Memory and learning allow animals to adapt and modify their behavior towards new experiences.
Some factors may result in memory deficits such as: neurodegenerative diseases, changes due to
intoxication and the use of drugs. Zebrafish can be used to model complex human behavioral traits
such as learning and memory. This study aims to establish a protocol for evaluating the object
recognition memory or object location tasks in zebrafish. We evaluated novel object recognition
memory and analyzed the exploration time of novel and familiar objects in the training and test
sessions. There was a preference of the animal to explore the new object in comparison to the
familiar object (61% of exploration time). We also evaluated the object location task and measured
the exploration time of each object in the familiar and novel object locations. There was a
preference of the animal to explore the object in the novel location in comparison to the object in
the familiar location (63% of exploration time). We also evaluated the effect of the non-competitive
NMDA receptor antagonist MK-801 on the object recognition and object location memory in
zebrafish. In this regimen treatment, control (water only) and treated animals (5 μM MK-801)
presented a significant preference in exploring the familiar object in comparison to the new object
(66 and 68% of exploration time, respectively); however, 10 μM MK-801-treated animals did not
show differences in the exploration time of the objects. In the object location task, the animals
treated with the 5 or 10 μM MK-801 did not show a significant preference for the familiar or novel
location whereas the control group had a higher preference in exploring the object in the familiar
location (64% of exploration time). Therefore, it is possible to suggest that 5 μM MK-801 impaired
the memory formation in an object location task, which is in agreement with previous studies
demonstrating the cognitive deficit induced by MK-801 treatment in aversive and spatial memory.
Considering the different responses of the control group between original task and in the regimen
treatment, we evaluated the impact of habituation on cortisol levels of animals in three different
protocols: 1) habituated at the experiment apparatus for 3 days (Condition 1 – C1), 2) habituated at
the experiment apparatus for 3 days plus treatment tank exposure at fourth day (Condition 2 - C2),
3) habituated at the treatment tank exposure and experiment apparatus for 3 days and exposed to
treatment tank again at fourth day (Condition 3 – C3). The results showed higher levels of cortisol
in animals submitted to C2 and C3 conditions compared to animals submitted to C1. These results
demonstrated that the animals submitted to treatment tank exposure have a different performance in
object recognition and object location memory due to stress responses. Therefore, these tasks are
prone to evaluate memory in physiological and pathological conditions, but its use is limited to
perform pharmacological studies due to sensitivity to stress caused by manipulation. |
